本技術屬于癌癥治療領域，且涉及使用結合至人ctla4的抗體與抗pd-1抗體派姆單抗組合治療癌癥的組成物和方法。

背景技術：

1、ctla4是免疫球蛋白(ig)蛋白質超家族的起下調t細胞活化以及維持免疫原性體內平衡的作用的成員。已顯示在同種同基因鼠前列腺癌模型中，體內抗體介導的ctla4阻斷使抗癌免疫應答增強(kwon等(1997)proc?natl?acad?sci?usa,94(15):8099-103)。此外，顯示阻斷ctla4功能會在攜帶腫瘤的小鼠中，在各種腫瘤生長階段下，使抗腫瘤t細胞應答增強(yang等(1997)cancer?res?57(18):4036-41；hurwitz等(1998)proc?natl?acad?sciusa?95(17):10067-7)。然而，對適于人類使用的基于抗體的治療劑的開發(fā)仍然是困難的，因為從臨床前動物模型向人類安全性的轉化經(jīng)常是不良的。因此，存在對在不同物種諸如人和實驗動物(例如小鼠、猴、大鼠等)之間具有交叉反應性的抗ctla4抗體的需要，以并行地能夠進行動物模型研究以及提供適合人治療性候選物。此外，存在對開發(fā)僅在某些情形下諸如在富含蛋白酶的腫瘤微環(huán)境中具有活性的更安全抗ctla4抗體的需要。

2、pd-1被認作免疫調節(jié)和維持外周耐受的重要分子。pd-1在原初t、b和nkt細胞中適度表達，并通過淋巴細胞、單核細胞和骨髓細胞上的t/b細胞受體信號傳導上調(sharpe,arlene?h等人，the?function?of?programmed?cell?death?1and?its?ligands?inregulating?autoimmunity?and?infection.nature?immunology(2007)；8:239-245)。

3、pd-1的兩種已知配體，pd-l1(b7-h1)和pd-l2(b7-dc)，在各種組織的人癌癥中表達。在例如卵巢癌、腎癌、結直腸癌、胰腺癌、肝癌和黑色素瘤的大樣品組中，不論后續(xù)治療如何，pd-l1表達都與不良預后和總體存活的降低相關(dong,haidong等人，tumor-associated?b7-h1?promotes?t-cell?apoptosis:a?potential?mechanism?of?immuneevasion.nat?med.2002年8月；8(8):793-800；yang,wanhua等人，pd-1interactioncontributes?to?the?functional?suppression?of?t-cell?responses?to?human?uvealmelanoma?cells?in?vitro.invest?ophthalmol?vis?sci.2008年6月；49(6(2008):49:2518-2525；ghebeh,hazem等人，the?b7-h1(pd-l1)t?lymphocyte-inhibitory?moleculeis?expressed?in?breast?cancer?patients?with?infiltrating?ductal?carcinoma:correlation?with?important?high-risk?prognostic?factors.neoplasia(2006)8:190-198；hamanishi,junzo等人，programmed?cell?death?1ligand?1and?tumor-infiltratingcd8+t?lymphocytes?are?prognostic?factors?of?human?ovariancancer.proc.natl.acad.sci.usa(2007):104:3360-3365；thompson,r?houston和eugened?kwon，significance?of?b7-h1?overexpression?in?kidney?cancer.clinicalgenitourin?cancer(2006):5:206-211；nomi,takeo等人clinical?significance?andtherapeutic?potential?of?the?programmed?death-1ligand/programmed?death-1pathway?in?human?pancreatic?cancer.clinical?cancer?research(2007)；13:2151-2157；ohigashi,yuichiro等人，clinical?significance?of?programmed?death-1ligand-1and?programmed?death-1ligand?2expression?in?human?esophagealcancer.clin.cancer?research(2005):11:2947-2953；inman,brant?a等人，pd-l1(b7-h1)expression?by?urothelial?carcinoma?of?the?bladder?and?bcg-inducedgranulomata:associations?with?localized?stage?progression.cancer(2007):109:1499-1505；shimauchi,takatoshi等人，augmented?expression?of?programmed?death-1in?both?neoplasmatic?and?nonneoplastic?cd4+t-cells?in?adult?t-cell?leukemia/lymphoma.int.j.cancer(2007):121:2585-2590；gao,qiang等人，overexpression?of?pd-l1?significantly?associates?with?tumor?aggressiveness?and?postoperativerecurrence?in?human?hepatocellular?carcinoma.clinical?cancer?research(2009)15:971-979；nakanishi,juro等人，overexpression?of?b7-h1(pd-l1)significantlyassociates?with?tumor?grade?and?postoperative?prognosis?in?human?urothelialcancers.cancer?immunol?immunother.(2007)56:1173-1182；hino等人，tumor?cellexpression?of?programmed?cell?death-1is?a?prognostic?factor?for?malignantmelanoma.cancer(2010):00:1-9)。類似地，發(fā)現(xiàn)在腫瘤浸潤性淋巴細胞上表達的pd-1標記乳腺癌和黑色素瘤中功能失調的t細胞(ghebeh,hazem等人，foxp3+tregs?and?b7-h1+/pd-1+t?lymphocytes?co-infiltrate?the?tumor?tissues?of?high-risk?breast?cancerpatients:implication?for?immunotherapy.bmc?cancer.2008年2月23日；8:57；ahmadzadeh,mojgan等人，tumor?antigen-specific?cd8?t?cells?infiltrating?thetumor?express?high?levels?of?pd-1and?are?functionally?impaired.blood(2009)114:1537-1544)并與腎癌不良預后相關(thompson,r?houston等人，pd-1is?expressed?bytumor?infiltrating?cells?and?is?associated?with?poor?outcome?for?patientswith?renal?carcinoma.clinical?cancer?research(2007)15:1757-1761)。因此，有人提出表達pd-l1的腫瘤細胞與表達pd-1的t細胞相互作用，以減弱t細胞的活化并逃避免疫監(jiān)視，從而導致對腫瘤的免疫反應受損。

4、多種抑制pd-1與其一個或兩個配體pd-l1和pd-l2相互作用的單克隆抗體已被批準用于治療癌癥。派姆單抗(merck?sharp&dohme?llc，rahway，nj，usa)是一種有效的人源化免疫球蛋白g4(igg4)單克隆抗體，其以高特異性結合程序性細胞死亡1(pd-1)受體，從而抑制與程序性細胞死亡配體1(pd-l1)和程序性細胞死亡配體2(pd-l2)的相互作用。根據(jù)臨床前體外數(shù)據(jù)，派姆單抗對pd-1具有高親和力和有效的受體阻斷活性。(派姆單抗)適用于多種適應癥患者的治療，并適用于患有微衛(wèi)星不穩(wěn)定-高或錯誤配對修復缺陷(msi-h/dmmr)的不可切除或轉移性結直腸癌患者的一線治療。派姆單抗是目前一線msi-h/dmmr?mcrc的標準療法。

技術實現(xiàn)思路

1、本技術提供了使用本公開的抗ctla4抗體與抗pd-1抗體派姆單抗組合治療癌癥的方法。所述抗ctla4抗體包含重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，其中所述重鏈可變區(qū)包含hvr-h1、hvr-h2和hvr-h3，且所述輕鏈可變區(qū)包含hvr-l1、hvr-l2和hvr-l3，其中所述hvr-h1包含根據(jù)式y(tǒng)sissgyhwswi(seq?id?no:23)的氨基酸序列，所述hvr-h2包含根據(jù)式laridwdddkyystslksrl(seq?id?no:35)的氨基酸序列，所述hvr-h3包含根據(jù)式arsyvyfdy(seq?id?no:45)的氨基酸序列，所述hvr-l1包含根據(jù)式rasqsvrgrfla(seq?id?no:58)的氨基酸序列，所述hvr-l2包含根據(jù)式dasnratgi(seq?id?no:66)的氨基酸序列，且所述hvr-l3包含根據(jù)式y(tǒng)cqqssswppt(seq?id?no:75)的氨基酸序列。

2、在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體包含含有seq?id?no:87的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)或與seq?id?no:87的氨基酸序列具有至少約90％(例如，至少約92％、95％、98％、99％或更多)序列一致性的其變體，和含有seq?id?no:100的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)或與seq?id?no:100的氨基酸序列具有至少約90％(例如，至少約92％、95％、98％、99％或更多)序列一致性的其變體。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體包含含有seq?id?no:87的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有seq?id?no:100的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。

3、在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體包含含有evqlvesggglvqpggslrlscaasgysissgyhwswirqapgkglewlaridwdddkyystslksrltisrdnskntlylqlnslraedtavyycarsyvyfdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk(seq?id?no:126)的氨基酸序列的重鏈區(qū)或與seq?id?no:126的氨基酸序列具有至少約90％(例如，至少約92％、95％、98％、99％或更多)序列一致性的其變體，和含有diqltqspsslsasvgdrvtitcrasqsvrgrflawyqqkpgkapklliydasnratgipsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyycqqssswpptfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec(seq?id?no:127)的氨基酸序列的輕鏈區(qū)或與seq?id?no:127的氨基酸序列具有至少約90％(例如，至少約92％、95％、98％、99％或更多)序列一致性的其變體。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體為包含含有seq?id?no:126的氨基酸序列的重鏈區(qū)和含有seq?id?no:127的氨基酸序列的輕鏈區(qū)的ty21580。

4、在一個方面，本發(fā)明提供一種治療受試者癌癥的方法，包含向受試者施用有效量的如上所述的抗ctla4抗體(例如，ty21580)與派姆單抗的組合，其中所述抗ctla4抗體以約3mg/kg至約10mg/kg的劑量施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約3mg/kg的劑量施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約5mg/kg的劑量施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約6mg/kg的劑量施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約8mg/kg的劑量施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約10mg/kg的劑量施用。

5、在一個實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約1mg/kg至約10mg/kg或約2mg/kg至約5mg/kg的劑量向受試者施用。在一些此類實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約3mg/kg的劑量向受試者施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)每三周一次向受試者施用。在其他實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)每六周一次向受試者施用。在特定實施方案中，所述抗ctla4抗體(例如，ty21580)以約3mg/kg每三周一次或每六周一次的劑量向患者施用。在任何前述實施方案中，派姆單抗可在特定給藥方案同一天或特定方案不同天與抗ctla4抗體組合施用。在一些實施方案中，抗ctla4抗體和派姆單抗均在給藥方案三周或六周的第一天施用。

6、在一些實施方案中，所述派姆單抗以約100mg至約300mg每三周一次的劑量施用。在一些實施方案中，所述派姆單抗以約200mg每三周一次的劑量施用。在一些此類實施方案中，所述抗ctla4抗體與所述派姆單抗同時施用。例如，所述抗ctla4抗體和派姆單抗可在給藥時間表三周或六周的第1天向有需要的患者施用。

7、在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗每三周一次向有需要的患者施用。在一些此類實施方案中，所述抗ctla4抗體以約2mg/kg至約5mg/kg(例如，3mg/kg)的劑量施用且派姆單抗以約100mg/kg至約300mg/kg(例如，約200mg)的劑量施用。在特定實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗同時施用。

8、在一些實施方案中，所述派姆單抗以約200mg至約400mg每六周一次的劑量施用。在一些實施方案中，所述派姆單抗以約400mg每六周一次的劑量施用。在一些此類實施方案中，所述抗ctla4抗體與派姆單抗同時施用。例如，所述抗ctla4抗體和派姆單抗可在給藥時間表三周或六周的第1天向有需要的患者施用。

9、在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗每六周一次向有需要的患者施用。在一些此類實施方案中，所述抗ctla4抗體以約2mg/kg至約5mg/kg(例如，3mg/kg)的劑量施用且派姆單抗以約200mg至約400mg(例如，約400mg)的劑量施用。在特定實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗同時施用。

10、在如上述方法中的任一者的一些實施方案中，癌癥對先前療法具有抗性或難治性，其中先前療法為ctla4、pd-1或pd-1配體抑制劑。在一些實施方案中，所述受試者對先前療法具有抗性或已從先前療法中復發(fā)，其中先前療法為ctla4、pd-1或pd-1配體抑制劑。在一些實施方案中，先前療法為ctla4抑制劑，例如伊匹木單抗。在一些實施方案中，先前療法為pd-1抑制劑，例如抗pd-1抗體。在一些實施方案中，先前療法為pd-1配體(如，pd-l1)抑制劑，例如抗pd-l1抗體。

11、在根據(jù)上文所述方法中的任一者的一些實施方案中，所述癌癥是肝癌、消化系統(tǒng)癌癥(例如結腸癌、結直腸癌)、肺癌、骨癌、心臟癌、腦癌、腎癌、膀胱癌、血液癌癥(例如白血病)、皮膚癌、乳腺癌、甲狀腺癌、胰腺癌、頭部和/或頸部癌癥、眼相關癌癥、男性生殖系統(tǒng)癌癥(例如前列腺癌、睪丸癌)或女性生殖系統(tǒng)癌癥(例如子宮癌、子宮頸癌)。在一些實施方案中，所述癌癥是實體癌。在一些實施方案中，所述癌癥是尿路上皮癌。在一些實施方案中，所述癌癥是腎細胞癌。在一些實施方案中，所述癌癥是胰腺癌。在一些實施方案中，所述癌癥是晚期癌癥。在一些實施方案中，所述癌癥是轉移性癌癥。在一些實施方案中，所述癌癥是kaposi氏癌癥。在一個實施方案中，癌癥包括但不限于結直腸癌、胃癌、胃食道交界癌、食管癌、子宮內膜癌或頭頸癌。在另一實施方案中，癌癥包括但不限于黑色素瘤、非小細胞肺癌(nsclc)、小細胞肺癌(sclc)、頭頸部鱗狀細胞癌(hnscc)、經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤(chl)、原發(fā)縱膈大b細胞淋巴瘤(pmbcl)、尿路上皮癌、微衛(wèi)星不穩(wěn)定-高或錯誤配對修復缺陷癌、微衛(wèi)星不穩(wěn)定-高或錯誤配對修復缺陷結直腸癌、胃癌、食管癌、子宮頸癌、肝細胞癌(hcc)、merkel細胞癌(mcc)、腎細胞癌(rcc)、子宮內膜癌、腫瘤突變負荷-高(tmb-h)癌、皮膚鱗狀細胞癌(cscc)或三陰性乳腺癌(tnbc)。本公開是關于一種治療有需要受試者癌癥的方法，包含向受試者施用包含至少兩種藥物組合物的組合療法。

12、在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗均為靜脈內施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體是皮下施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗是靜脈內或皮下每三周一次施用。在一些實施方案中，所述抗ctla4抗體和派姆單抗靜脈內或皮下每六周一次施用。在一些實施方案中，所述受試者接受至少4個周期的抗ctla4抗體和派姆單抗治療。在一些實施方案中，受試者還接受維持治療，包括大約每四周一次至大約每十二周一次(例如，每4、6、8、10或12周一次)向受試者施用有效量的抗ctla4抗體。在一些實施方案中，可同時施用一定劑量的抗ctla4抗體和派姆單抗。在其他實施方案中，可施用一定劑量的抗ctla4抗體和派姆單抗。例如，派姆單抗可在抗ctla4抗體給藥時間表(例如，三周給藥時間表)第1天施用前或后約0.5小時至約5小時施用。

13、在根據(jù)上文所述方法中的任一者的一些實施方案中，所述受試者為人。

14、應了解，以上以及本文中所述的各種實施方案的性質中的一者、一些或全部可加以組合以形成本公開的其他實施方案。本公開的這些和其他方面將變得為本領域技術人員顯而易知。本公開的這些和其他實施方案通過隨后具體實施方式來進一步描述。